酶联免
- 产品简介: 本试剂盒用于测定人血清、血浆、细胞、机闭匀浆及联系液体样本中游离三碘甲状腺原氨酸(FT
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一、产品简介:
本试剂盒用于测定人血清、血浆、细胞、机闭匀浆及联系液体样本中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)含量。
本试剂盒操纵双抗体夹心法测定标本中人游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)程度。用纯化的人游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)抗体包被微孔板,造成固相抗体,往包被单抗的微孔中次第出席游离三碘甲状腺原氨酸(FT3),再与HRP标志的游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)抗体联合,酿成抗体-抗原-酶标抗体复合物,源委彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB正在HRP酶的催化下转化成蓝色,并正在酸的感化下转化成最终的黄色。色彩的深浅和样品中的游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)呈正联系。用酶标仪正在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过程序弧线打算样品中人游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)浓度。
1.标本搜集后尽早实行提取,提取按联系文件实行,提取后应尽速实行测验。若不行马前实行试验,可将标本放于-20℃存在,但应避免屡屡冻融
1.程序品的稀释:本试剂盒供给原倍程序品一支,用户可遵从下列图表正在幼试管中实行稀释。32pmol/L
2.加样:永别设空缺孔(空缺比照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作沟通)、程序孔、待测样品孔。正在酶标包被板上程序品确实加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻动摇混匀。
5.洗涤:幼心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,这样反复5次,拍干。
9.显色:每孔先出席显色剂A50μl,再出席显色剂B50μl,轻轻动摇混匀,37℃避光显色10分钟.
11.测定:以空缺孔调零,450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。测定应正在加终止液后15分钟以内实行。
以程序物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,正在坐标纸上绘出程序弧线,依照样品的OD值由程序弧线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用程序物的浓度与OD值打算出程序弧线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,打算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的现实浓度。

1.试剂盒从冷藏境遇中取出应正在室温平均15-30分钟后方可行使,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中存在。
3.各步加样均应行使加样器,并时时核对其确实性,以避免试验差错。一次加样年光最好驾御正在5分钟内,如标本数目多,保进行使排枪加样。
4.请每次测定的同时做程序弧线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于程序品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定,打算时请最终乘以总稀释倍数(×n×5)。