2024年3月，国度卫健委、墟市囚禁总局联结颁布了47项食物安寰宇家规范和6项篡改单，个中包罗《食物安寰宇家规范食物微生物学磨练僧人氏菌磨练》（GB 4789.4-2024）磨练举措规范。这一新规范对实习修造、原料和试剂、磨练秩序与操作环节举行了篡改，并将于2024年8月8日践诺。本文就该规范厉重修订实质、操作属意事项举行解读。
转移1：正在“预增菌”环节中新增了正在磨练乳粉样品时，须将样品倒入225mLBPW造就基表观，静置60min后再举行预增菌。乳粉类样品经历高温喷雾干燥，个中的僧人氏菌公多处于受损状况；乳粉相对干燥且水活度低，个中受损的僧人氏菌适宜了干燥的处境。正在这种环境下，倘若受损的僧人氏菌正在BPW中速捷混匀水化，受损的僧人氏菌会浮现排泄压息克；采用浸泡法正在室温要求下静置一段时期后再举行预增菌，可能推进受损僧人氏菌的苏醒，进步检出率。
转移2：遴选性增菌造就基由氯化镁孔雀绿大豆胨（RVS）增菌液代庖亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液，而且BPW接种量改为0.1mL到10mL RVS中，遴选性增菌温度为42℃± 1℃。SC增菌液厉重实用于伤寒僧人氏菌的遴选性增菌，但通过近几年疾病监测呈现，我国伤寒、副伤寒僧人氏菌的发病率从10例/10万消浸到0.8例/10万足下，而非伤寒僧人氏菌近年来发病率到达560例/10万，正在微生物激励的食源性疾病中排前2位。从造就基因素上看，RVS中含有孔雀绿，不妨贬抑非僧人氏菌的滋长，大豆卵白胨有利于僧人氏菌的苏醒；SC增菌液装备须要的亚硒酸氢钠拥有肯定毒性，正在康健环保方面也存正在安然危害，且原料担心定，太过加热造就基容易变性导致功用失效。
转移3：TTB四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）遴选性增菌改为：低靠山菌造就温度为36℃±1℃，高靠山菌造就温度为42℃± 1℃。体会证呈现，正在42℃处境下，对待生鲜样品非僧人氏菌有较好抑菌效用，比正在36℃处境下的遴选性更好，因此赓续沿用；而对待深加工样品，僧人氏菌正在36℃处境下比正在42℃处境下滋长更好。因此低靠山样本造就温度采用36℃±1℃，高靠山样本造就温度采用42℃±1℃。
转移4：可能将预增菌的造就液、遴选性造就液正在2~8℃保全不赶上72h，再举行后续磨练。验证呈现，预增菌造就物、遴选性造就物正在4℃冷藏处境下存放不赶上72幼时，不会影响后续磨练。
样品的无误统治与否会直接影响检测结果确切切性，新版规范中也对样品的pH值、冷冻样品的解冻都作了昭彰恳求，然而正在统治少许迥殊样品时还须要极度属意。
如：正在检测鲜蛋类样品时须要将鲜蛋正在活动水下洗净，待干后用75%酒精棉消毒蛋壳，然后依照磨练恳求翻开蛋壳取出卵白、蛋黄或全蛋液，放入带有玻璃珠的灭菌瓶内，富裕摇匀待检；
正在检测脂肪含量赶上20%的肉成品时，可依照脂肪含量插足妥当比例的灭菌吐温-80举行乳化混匀，也可将增菌液预热至44℃~47℃再举行检测；
正在检测硬质糖果或夹心糖果时须要行使无菌铰剪将样品从中心剪开，漏出夹心物，并正在不赶上45℃的水浴中融解15min后磨练；
跟着《食物安寰宇家规范食物微生物学磨练肉与肉成品采样和磨练统治》（GB 4789.17-2024）等12个闭系规范的践诺，蕴涵僧人氏菌磨练正在内的其他食物微生物学磨练中样品统治逐步榜样，这不只恳求磨练员正在实习操作中厉苛服从规范恳求举行造样，同时也恳求正在原始纪录中应昭彰纪录样品的造备进程。
正在新版规范中从增菌环节滥觞，每一磨练环节均恳求混匀增菌液，目标是为了不妨让方向造就物不妨平均漫衍。固然大大批僧人氏菌（除鸡僧人氏菌和鸡雏僧人氏菌）均有鞭毛，大批有菌毛，然而正在经历食物深加工后，僧人氏菌不妨会浮现动力损失的形势，故为了防守方向菌浸底，均恳求混匀后再接种，避免漏检产生。
新版规范中原则了正在TTB增菌中深加工食物（低靠山样本）采用36℃造就，生鲜食物（高靠山样品）采用42℃造就。然而，正在本质环境中不少深加工食物坐蓐企业的处境卫生相对较差，微生物污染较为要紧，正在这种环境下简单服从规范原则的格式采用36℃造就，就会有非方向菌角逐僧人氏菌导致其无法滋长，从而浮现漏检的环境。其它，正在列入僧人氏菌才具验证或盲样侦察时，正在欠亨晓侦察单元加菌量多少的环境下，倡导正在举行TTB遴选性增菌时采用36℃、42℃两种温度同时造就，确保实习确切切性。
新规范的附录中将TTB的配造由素来的灭菌改为了加热煮沸即可，然而新规范昭彰原则TTB的增加剂（煌绿与碘液）要正在临用前再增加。而目前市情上出卖的即用型TTB造就基均提前增加了上述两种增加剂，这与规范恳求不符。于是，正在规范践诺后，实习单元正在行使即用型TTB时谋面对规范偏离的危害。
血清学实习是僧人氏菌检测的紧张环节，固然目前没有规范涉及诊断血清的质控举措，但为确保实习确切性，实习室应举行诊断血清的质料把握：O/H多价血清用同类全套抗原代表菌株举行玻片凝固；单价血清用该单价所属多价血清蕴涵的其他菌株举行玻片凝固实习。
